trình bày quy trình thí nghiệm xác định protein .xác định glucose ,lipid trong tế bào
Quảng cáo
4 câu trả lời 393
1. Xác định Protein (Thí nghiệm Biuret)
Nguyên liệu, dụng cụ: dung dịch tế bào (hoặc dịch chiết), dung dịch CuSO₄ 1%, NaOH 10%, ống nghiệm, pipet.
Quy trình:
Lấy 2–3 ml dịch chiết tế bào vào ống nghiệm.
Thêm 1 ml dung dịch NaOH 10% vào.
Thêm 1–2 giọt dung dịch CuSO₄ 1%.
Lắc nhẹ và quan sát.
Kết quả:
Nếu có protein → dung dịch chuyển từ xanh sang tím.
Không có protein → dung dịch không đổi màu.
2. Xác định Glucose (Thí nghiệm Fehling)
Nguyên liệu, dụng cụ: dung dịch Fehling A, Fehling B, ống nghiệm, pipet, bếp gas hoặc đèn cồn.
Quy trình:
Trộn 1 ml dung dịch Fehling A + 1 ml Fehling B trong ống nghiệm.
Thêm 1–2 ml dịch chiết tế bào.
Đun nhẹ trong nước sôi 1–2 phút.
Kết quả:
Nếu có glucose → xuất hiện kết tủa đỏ gạch.
Không có glucose → dung dịch không thay đổi màu.
3. Xác định Lipid (Thí nghiệm Sudan III hoặc giấm dầu)
Nguyên liệu, dụng cụ: dung dịch Sudan III (hoặc dầu), ống nghiệm, pipet.
Quy trình:
Lấy một vài giọt dịch chiết tế bào vào ống nghiệm.
Thêm vài giọt Sudan III và lắc đều.
Kết quả:
Nếu có lipid → lipid sẽ màu đỏ cam, nổi thành giọt riêng biệt.
Không có lipid → dung dịch không có màu đỏ cam riêng biệt.
Ghi chú chung
Thí nghiệm cần thực hiện cẩn thận, tránh để thuốc thử bắn ra ngoài.
Kết quả cần so sánh với ống nghiệm chứng (không chứa mẫu) để chính xác.
Các phản ứng này dựa trên sự tạo phức hoặc màu của hợp chất với protein, glucose, lipid.
1. Xác định Protein trong tế bào (Phương pháp Biuret)
Nguyên tắc: Protein có nhóm peptit (-CO-NH-) phản ứng với Cu²⁺ trong dung dịch kiềm tạo hợp chất màu tím.
Dụng cụ, hóa chất: ống nghiệm, pipet, dung dịch NaOH, dung dịch CuSO₄, mẫu tế bào (dịch chiết).
Quy trình:
Cho một lượng dịch chiết tế bào vào ống nghiệm.
Thêm vài giọt dung dịch NaOH 10%.
Thêm vài giọt dung dịch CuSO₄ 1%.
Lắc nhẹ, để yên 2–3 phút.
Quan sát màu sắc: nếu có màu tím, chứng tỏ trong tế bào có protein.
2. Xác định Glucose trong tế bào (Phản ứng với Benedict)
Nguyên tắc: Glucose là đường khử, khi đun nóng với dung dịch Benedict tạo kết tủa đỏ gạch hoặc vàng nâu.
Dụng cụ, hóa chất: ống nghiệm, pipet, dung dịch Benedict, nguồn nhiệt.
Quy trình:
Cho dịch chiết tế bào vào ống nghiệm.
Thêm dung dịch Benedict (theo tỉ lệ 1:1).
Đun sôi nhẹ 2–3 phút.
Quan sát kết quả:
Kết tủa xanh → ít glucose
Kết tủa vàng/đỏ → nhiều glucose
3. Xác định Lipid trong tế bào (Phương pháp nhuộm Sudan III hoặc dầu mỡ)
Nguyên tắc: Lipid hòa tan trong dung môi hữu cơ và nhuộm màu bằng Sudan III, tạo màu đỏ cam.
Dụng cụ, hóa chất: ống nghiệm, pipet, dung dịch Sudan III, ethanol, dịch chiết tế bào.
Quy trình:
Lấy dịch chiết tế bào vào ống nghiệm.
Thêm ít ethanol để hòa tan lipid.
Thêm vài giọt dung dịch Sudan III.
Lắc đều, để yên 1–2 phút.
Quan sát: nếu có lipid, xuất hiện giọt đỏ cam nổi lên hoặc màu đỏ cam đồng nhất.
Lưu ý chung khi thí nghiệm:
Thí nghiệm protein, glucose và lipid cần dùng mẫu tế bào tươi hoặc dịch chiết.
Thực hiện trong ống nghiệm sạch, tránh nhiễm bẩn để kết quả chính xác.
Quan sát màu sắc cẩn thận và so sánh với ống đối chứng.
1. Xác định protein trong tế bào (thí nghiệm Biuret)
Nguyên tắc: Protein tác dụng với dung dịch đồng(II) sulfat trong môi trường kiềm tạo phức màu tím.
Quy trình:
1.Chuẩn bị dung dịch chiết xuất tế bào.
2.Cho vài giọt dung dịch chiết vào ống nghiệm.
3.Thêm dung dịch NaOH và CuSO₄ (thuốc thử Biuret).
4.Lắc nhẹ và quan sát màu.
Kết quả: Màu tím xuất hiện → protein có mặt.
2. Xác định glucose trong tế bào (thí nghiệm Benedict)
Nguyên tắc: Glucose khử ion Cu²⁺ trong dung dịch Benedict tạo kết tủa đỏ gạch khi đun nóng.
Quy trình:
1.Chuẩn bị dung dịch chiết xuất tế bào.
2.Cho 1–2 ml dung dịch vào ống nghiệm.
3.Thêm dung dịch Benedict.
4.Đun cách thủy hoặc trên bếp sôi nhẹ.
5.Quan sát màu kết tủa.
Kết quả: Kết tủa đỏ gạch → glucose có mặt.
3. Xác định lipid trong tế bào (thí nghiệm Sudan III hoặc Ether)
Nguyên tắc: Lipid hòa tan trong dung môi hữu cơ, nhuộm màu bằng Sudan III hoặc tạo màng dầu trên bề mặt nước.
Quy trình:
1.Chiết lipid từ tế bào bằng ether hoặc cồn nóng.
2,Thêm vài giọt thuốc thử Sudan III.
3.Lắc đều hoặc để yên quan sát.
Kết quả: Lipid màu đỏ cam tách ra → lipid có mặt.
Quảng cáo
Bạn cần hỏi gì?
Câu hỏi hot cùng chủ đề
-
Đã trả lời bởi chuyên gia
1984 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1932 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1874 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1613 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1530 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1483 -
Đã trả lời bởi chuyên gia
1313
